Blasticidin S,杀稻瘟菌素S(灭瘟素)

发布者:艾美捷科技发布时间:2021-01-18

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      Blasticidin S杀稻瘟菌素S(灭瘟素)是一种多肽核苷类抗生素。它首先从S.griseochromogenes中分离出来。利用衍射仪数据确定了五水合物形式的结构,与抗生素阿米西汀相似,亲水和疏水基团位于分子的两侧。此后利用全合成法创造了它。在研究中,Blasticidin S用于筛选携带有bsr或BSD耐受基因的转染细胞。杀稻瘟菌素具有快速而强效的作用模式,很低的抗生素浓度便能导致细胞迅速死亡。

 Blasticidin-S.png

      目前已经克隆和测序的杀稻瘟菌素耐受基因有3种,一种是分离自产生菌Streptoverticillum sp.的乙?;泼富騜ls,另外两种是脱氨酶基因,包括从Bacillus cereus 中分离的bsr和从Aspergillus terreus 中分离的BSD 基因。Bsr和 BSD 基因是最常用的筛选标志,用于哺乳动物和植物细胞的基因转移实验,也可用于E.Coli。

      作为专业的生命科学产品与方案供应商,艾美捷科技为您推荐这款,备受客户青睐的科研专用Blasticidin S,杀稻瘟菌素S(灭瘟素)试剂

Blasticidin-S-1.png

名称 Blasticidin S,杀稻瘟菌素S(灭瘟素)
货号 CAC-14499
CAS号 3513-03-9
分子式 C17H26N8O5 • HCl
分子量 458.9
纯度 ≥95%(HPLC)
形式 结晶固体
保存条件 冰袋运输。-20℃保存。粉末有效期2年
说明书 点击下载

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       1)Escherichia coli应用浓度

      Ecoli对Blasticidin S的敏感性稍差,但是转化子对Blasticidin S具有耐受性,可以用低盐LB培养基(pH 8)进行筛选,浓度范围为50-100 ug/mlBlasticidin S。高pH值可以提高Blasticidin S的活性。

       2)哺乳动物细胞,应用浓度

      哺乳动物细胞中Blasticidin S的工作浓度范围在1-50 ug/ml(通常为10 ug/ml)。初次实验建议通过灭杀曲线来确定最佳使用浓度。一些哺乳动物细胞的建议工作浓度:

细胞 种属 培养基 浓度(ug/ml)
HEK 293 DMEM 3-10 ug/ml
Hela DMEM 3-10 ug/ml
B16 小鼠 RPMI 3-10 ug/ml
CHO 仓鼠 DMEM 5-10 ug/ml
PC1.0 仓鼠 RPMI 10-30 ug/ml

      操作步骤(哺乳动物稳转株筛?。?/b>

      1)转染后48h,用含有适宜浓度Blasticidin S的新鲜培养基将细胞传代(注:细胞处于活跃分裂期时抗生素工作最好。细胞密度太高,抗生素效率降低。细胞分盘时覆盖率最好不超过25%)。

      2)每3-4天去除培养基,加入含抗生素的新鲜培养基。

      3)7天后检测细胞集落形成。根据宿主细胞种类和转染/筛选效率,集落形成可能需要增加一周或更久。      

      4)转移5-10个耐受克隆到35 mm细胞盘中,加入选择培养基维持培养7天。随后用细胞毒性实验进行检测。

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